羅晶1，高燕2，李忠東1,2

( 1.安徽醫科大學空軍臨床學院, 合肥230032   2.空軍總醫院藥學部，北京100142)

[摘要] 目的:建立高效液相色譜紫外檢測法測定大鼠腎臟組織中多粘菌素B的含量并用LC-MS/MS進行結果驗證。方法:以100%的磺基水楊酸沉淀蛋白，色譜柱為Platisil ODS C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為乙腈-無水硫酸鈉(0.7%, m/v)-磷酸(6.8%, v/v)–水(22.25:50:5:22.75)；流速為1.0 mL·min-1；檢測波長為205nm。首先以高中低三個濃度與腎臟組織勻漿進行混勻，來建立體外方法學，然后以不同劑量（16mg·kg-1、8mg·kg-1、4mg·kg-1）從尾靜脈給予大鼠，連續3天，檢測大鼠腎臟中的多粘菌素B的濃度。結果：采用高效液相方法時，腎臟組織中多粘菌素B檢測濃度線性范圍為2~20 μg·mL－1（R2＝0.9978）。體外高、中、低3 個濃度的絕對回收率均在100%左右; 日內、日間精密度的RSD均小于5.0%; 樣品處理前后及反復凍融的穩定性的RSD均小于10%。高、中、低3個劑量組的大鼠腎臟中藥物含量分別為86.16±3.28；47.40±0.51；20.48±1.63μg·g-1。LC-MS/MS驗證結果分別為80.64±2.17；42.44±0.61；24.46±3.04μg·g-1，兩者無顯著性差異。 結論：100%的磺基水楊酸沉淀蛋白，可使高效液相色譜紫外檢測法用于檢測大鼠腎臟中多粘菌素B的含量，其結果與LC-MS/MS法測定的結果相似。

[關鍵詞] 高效液相色譜法；大鼠；腎組織；多粘菌素B；LC-MS/MS